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人肺胰癌細胞系-A549

價 格¥1199
產品編號:GL0014
細胞數量:1*10^6
組織來源
細胞種屬:人
培養基
形態特征:多角形
傳代方法:1:2-1:3傳代
培養條件:RPMI 1640培養液
細胞描述
細胞凍存
細胞運輸

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產品詳情

A549細胞的傳代:

    (1)無菌操作打開培養瓶瓶蓋,倒掉培養液。
    (2)向已經長滿的細胞中加入消化液1ml輕輕搖動培養瓶,使消化液流遍細胞表面,吸棄或倒掉,輕輕沖洗細胞表面2~3遍,以盡可能去除原培養液中的牛血清。
    (3)加入1 ml消化液,在37°C培養箱中孵育5~8 min后把培養瓶放置在倒置顯微鏡下觀察,發現細胞的胞質回縮、胞間質增大后,立即終止消化。
    (4)加入5 ml預熱至37°C的培養液,用玻璃吸管反復吹打以分散細胞。吹打過程按順序進行,從培養瓶底部-邊開始到另一邊結束,以確保所有的底部都被吹到。

    (5)吸取一半的細胞懸液,接種到新的培養瓶中,補足培養液,并且添加10%-20%的胎牛血清。通常每瓶液體量為5-10ml。
    (6)倒置顯微鏡下觀察,37C、5%CO2培養。

注意事項:
    (1)所有液體在加入細胞瓶前均應預熱到37C。所有液體均應調整pH至7.2左右,均不能超過7.4。
    (2)細胞消化傳代時吹打不要產生氣泡,吹打力量不宜過多,否則會損傷細胞。
    (3)嚴格執行無菌操作的要求。
    (4)盡可能減少消化液剩余量,過多時會對細胞產生損傷,可多添加些含牛血清的培養液中和。
    (5)培養瓶在室溫中放置時間應盡可能短。


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