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外泌體

外泌體

外泌體是多泡體限制性膜與細胞質膜融合而釋放的脂質雙層膜囊泡,直徑約30~200 nm,電子顯微鏡下呈雙凹碟形或杯狀,外泌體能夠運載其內源性的蛋白質、脂質、核酸、miRNA等信息物質參與細胞間通訊和機體的生理代謝過程,被認為是細胞間通訊、疾病診斷和預后循環生物標志物的重要載體,在臨床診斷和治療方面展現出了極具前景的研究價值。外泌體通過其攜帶的蛋白質、核酸、脂類等來調節受體細胞的生物學活性,從而參與機體免疫應答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、腫瘤侵襲等生物學過程。

 

外泌體的負富集分離

外泌體在大小、來源和分子內容物方面均存在高度異質性,因此富集分離外泌體是開展其基礎研究和臨床轉化應用的前提。傳統經典的富集分離外泌體的方法有:超速離心、密度梯度離心、共沉淀等技術手段。

外泌體1.png


外泌體鑒定

WB/ELISA檢測膜蛋白:CD9、CD63、CD81,Alix, TSG101, annexins, Rabs等

透射電鏡:形態學鑒定, 雙層囊膜結構是外泌體重要標志之一。

Nanosight粒徑密度分布分析:外泌體特征粒徑大多數處于100nm左右。


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外泌體顯微成像. a) SEM;b) TEM; c) cryo-EM; d) AFM

from Shao, H., et al. 2018. Chem Rev.


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WB和ELISA鑒定外泌體蛋白. a) WB; b)  ELISA

from Shao, H., et al. 2018. Chem Rev.


需確認的信息

1. 樣本類型及種屬

2. 樣本數量

3. 需鑒定方式(WB、ELISA、TEM)

 

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