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mPTP

mPTP:是線粒體內外膜之間的一組蛋白復合體,是由外膜的電壓依賴的陰離子通道(VDAC)、內膜的腺嘌呤核苷轉位蛋白(ANT)以及親環素D等組成。線粒體通透性轉換孔(mPTP)在細胞的生存、凋亡中扮演著重要角色,它涉及缺血/再灌注、腫瘤、衰老、神經變性等多個領域。


檢測手段

線粒體膜通道孔(MPTP)熒光檢測


實驗步驟

純化線粒體樣品,樣本的一系列處理:

 

選擇下列方式之一進行操作:

1. 使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測):

①移取10微升上述懸液到載波片上,蓋上蓋玻片

②激發波長488nm,散發波長505nm――

綠色熒光減弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增強

 

2.  或使用熒光分光光度儀或熒光酶標儀檢測(定量檢測):

①移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板

②即刻放進熒光分光光度儀或熒光酶標儀:激發波長488nm,散發波長505nm――

RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增強

 

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熒光顯微鏡觀察檢測

 

實驗周期及交付標準

1. 實驗周期:2-3周

2. 交付標準:熒光圖片、比值、實驗報告(實驗步驟、試劑、儀器)

 

需確認的信息

1. 樣本種屬及類型(組織還是細胞)

2. 樣本數量

3. 是否提供探針


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