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細胞數量

細胞數量:是細胞培養中一項最為基礎的指征。


實驗意義

在細胞生物學和分子生物學的實驗中,細胞實驗通常要進行細胞數量的檢測,調整細胞至最適合密度,才可進行后續的實驗操作(如傳代、轉染和流式細胞術等),很多實驗要對細胞數量進行統計學分析也需要對細胞進行計數操作。


實驗步驟

1. 通過軟件對顯微鏡照片進行細胞計數,或者通過細胞計數儀全自動進行計數;

2. 可根據需要對需計數的細胞進行染色,主要有三種染色方法;

3. 臺盼藍染色法:臺盼藍染液可用于檢測具有完整細胞膜的正常活細胞,染色后可拍照后計數或直接計數儀計數即可對細胞存活率進行比較精確的定量。

4. PI(碘化丙啶)染色:PI可對細胞核的DNA進行染色,經常用于檢測細胞凋亡,染色后進行細胞計數。

5. Hoehest33342是一種穿透細胞膜的藍色熒光染料,常用來檢測細胞凋亡也可用于細胞核染色或常規DNA染色,染色后可通過熒光顯微鏡、流式細胞儀和細胞計數儀進行檢測。


結果展示

1. 臺盼藍法[1]

臺盤藍.png

2. PI染色法[2]

PT染色法.png




實驗完成周期及交付標準

1. 實驗周期:1-3天

2. 交付標準:細胞計數結果、染色圖片、實驗報告(實驗步驟、試劑、儀器等)


需確認的信息 

1. 細胞類型及種屬

2. 細胞分組

3.細胞處理方式


文獻參考

[1] Crowley L. C., Marfell B. J., Christensen M. E., et al. Measuring Cell Death by Trypan Blue Uptake and Light Microscopy [J]. 2016, 2016(7): pdb.prot087155.

[2] Niu J., Li C., Wu H., et al. Propidium iodide (PI) stains Nissl bodies and may serve as a quick marker for total neuronal cell count [J]. Acta Histochemica, 2015, 117(2): 182-7.

[3] Chen M., Wang J., Yao S. F., et al. Effect of YAP Inhibition on Human Leukemia HL-60 Cells [J]. International Journal of Medical Sciences, 2017, 14(9): 902-10.

 

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